Выделение ДНК из листовых дисков земляники садовой
Выполнено выделение геномной ДНК из листьев исследуемых сортов земляники. Для каждого образца отбирали по 0,1 г листовой ткани, которую измельчали до однородной массы. Далее проводили лизис клеток с использованием лизирующего раствора и протеиназы К, после чего образцы инкубировали при 60 °С. Для очистки ДНК применяли последовательные этапы центрифугирования, экстракции, сорбции на сорбенте и промывки специальными растворами. После высушивания сорбента была проведена элюция ДНК и полученные образцы оставлены на хранение в холодильнике.

На следующий день приготовили 1× ТАЕ-буфер и 1%-ный агарозный гель с добавлением бромистого этидия. После застывания геля провели электрофорез выделенной ДНК: в первую лунку внесли маркер молекулярной массы, в остальные — образцы ДНК с буфером для нанесения. Электрофорез проводили при напряжении 110 В в течение 30 минут.
Для оценки качества и концентрации выделенной ДНК была выполнена спектрофотометрия на приборе NanoDrop. Для каждого образца определяли концентрацию ДНК, а также соотношения A260/A280 и A260/A230, характеризующие степень очистки образцов от белков и полифенольных соединений.
Made on
Tilda